色譜常見使用問題的詳細解答

問：用HPLC進行分析時保留時間有時發(fā)生漂移，有時發(fā)生快速變化，原因何在?如何解決?
　　( 答：關于漂移問題：
　　1、溫度控制不好，解決方法是采用恒溫裝置，保持柱溫恒定
　　2、流動相發(fā)生變化，解決辦法是防止流動相發(fā)生蒸發(fā)、反應等
　　3、柱子未平衡好，需對柱子進行更長時間的平衡
　　關于快速變化問題
　　1、流速發(fā)生變化，解決辦法是重新設定流速，使之保持穩(wěn)定
　　2、泵中有氣泡，可通過排氣等操作將氣泡趕出。
　　3、流動相不合適，解決辦法為改換流動相或使流動相在控制室內進行適當混合
　　問：色質聯用中毛細柱的選擇應注意什么問題?
　　答：1、柱效要高
　　2、熱穩(wěn)定性好
　　化學惰性強
　　具體選擇應注意
　　1、柱極性。根據分析樣品選擇不同極性的柱子進行分析
　　2、柱子內徑。內徑大小決定柱容量
　　3、液膜厚度。分析樣品溫度一不一樣，對膜厚有不同要求，溫度高液膜要厚，溫度低液膜要薄
　　4、柱長度。柱越長，柱效越高，分離效果越好，但也存在吸附問題，柱子過長，分析時間長，因此要根據樣品考慮柱子長度
　　5、外涂層(柱體)的選擇
　　6、另外還有儀器型號、分析對象等因素
　　問：液相色譜中峰出現拖尾或出現雙峰的原因是什么?
　　答：1、篩板堵塞或柱失效，解決辦法是反向沖洗柱子，替換篩板或更換柱子。
　　2、存在干擾峰，解決辦法為使用較長的柱子，改換流動相或更換選擇性好的柱子
　　( 問：從那些方面可以簡單判別毛細管柱子的熱穩(wěn)定性好壞?
　　答：1、分配容量(或容量因子)K，好的柱子在高溫運行后，分配容量K不應有明顯的下降，否則，說明柱子的熱穩(wěn)定性不好。
　　2、理論塔板數n，熱穩(wěn)定性好的柱子經受高溫后，理論塔板數應基本保持恒定
　　3、柱子的極性。熱穩(wěn)定性好的柱子，高溫前后極性變化不大，具體表現為保留指數I值沒有大的變化。
　　4、噪聲。熱穩(wěn)定性好的柱子在高溫下使用后，噪聲不能增加.
　　5、柱子的去活層，毛細管柱子涂固定液前內部一般要用去活性試劑去活以增加惰性。質量好的毛細管柱子高溫后，去活層
　　不應該變化，表現在對強極性樣品或酸堿性樣品的吸附性不能增加。